导图社区 第8章 病原性球菌检验
书本:临床微生物学检验技术(“十二五”人卫版),本文提炼书中的重点内容,进行归纳整理,涵盖本书所有核心内容,非常方便大家学习。适用于考试复习、预习,提高学习效率。
编辑于2024-09-22 15:41:47《临床血液学检验技术思维导图》作品集,系统梳理了血液细胞分析、形态学识别、流式细胞术、凝血功能检测等核心知识点。通过直观的思维导图形式,助力医学学习者与从业者快速掌握临床血液检验精髓,提升诊断效率与准确性。
《临床微生物学检验技术思维导图》作品集,全面覆盖临床微生物学检验的精髓。该作品集以思维导图形式,深度解析细菌、真菌、病毒等微生物的检验流程、鉴定方法、药敏试验等关键词,助力医学检验人员快速掌握核心技能。
《临床生物化学检验技术思维导图》作品集,系统整合临床生物化学检验的核心知识与技能。该作品集以思维导图形式,精准覆盖检验方法、质量控制、疾病诊断、实验室管理等关键词,助力医学检验人员快速掌握临床生物化学检验精髓。
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病原性球菌检验
葡萄菌属
临床意义
广泛分布于自然界、人体表面,定植在全身的皮肤和鼻咽部
可以引起全身感染和局部感染
致病物质
侵袭性酶
血浆凝固酶
能够使血浆凝固,在菌体表面形成不溶性纤维蛋白,保护菌体不受到杀菌物质的侵害
能抗单核巨噬细胞的吞噬作用
耐热核酸酶
分解DNARNA核酸
透明质酸酶
溶解透明质酸,在组织内可以自由散播形成较大的病灶
脂酶
溶解脂肪,侵袭皮肤皮下
毒素
葡萄球菌溶血素
致病的主要是α溶血素,在培养基🧫上产生ß溶血环,溶血能力强
很彻底的溶血
能溶解红细胞、损伤血小板和白细胞
杀白细胞素
破坏中性粒细胞、巨噬细胞等
肠毒素
引起食物中毒症状的原因,刺激呕吐中枢引起胃肠道症状
可溶性蛋白质,耐热
表皮剥脱毒素
引起烫伤样综合征
毒性休克综合征毒素
出现机体多器官的系统功能紊乱 或毒性休克综合征
金黄色葡萄球菌所致的疾病
侵袭性疾病
皮肤感染、器官感染、全身感染
毒素性疾病
食物中毒、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征
生物学特性
形态结构
G+,成团成堆排列,典型排列如”葡萄样“
没有芽孢、鞭毛、荚膜
主要是依靠毒素进行致病,没有物理性防护
培养特性
营养要求较低,所以能在大部分地方都能定植
普通琼脂平板上即可生长
抵抗力较强,在100-150g/L NaCl培养基中能生长,对碱性染料敏感
肉眼可见明显的ß溶血环
抗原
SPA抗原,是葡萄球菌表面细胞壁上的表面蛋白
用含有SPA的金葡菌作为载体,吸附特异性抗体,进行凝集实验
快速检测鉴别这个菌
协同凝集实验
抵抗力
耐干燥、耐盐、耐药
可以在高盐培养基中培养筛选
微生物检验
采集标本
脓液、咽拭子、穿刺液、尿液、痰液、血液
粪便、呕吐物
用于检测是否是食物中毒的原因
注意事项
根据感染部位采集标本
避免病灶周围正常菌群的污染
防止干扰正常的检测
标本直接检查
显微镜检查
可能运气好能见到白细胞正在吞噬细菌的现象
G+、球菌、排列成堆,疑似葡萄球菌
抗原检测
SPA
核酸检测
分离培养
血标本先接种肉汤培养 增菌培养基
富集检测的细菌数量
高盐培养基选择性接种培养
🧫可见光滑凸起、金黄色、白色或柠檬色的菌落
有的产生ß溶血环
有无ß溶血环、是否是金黄色并不是鉴定金葡菌的金标准
🧫可利用高盐甘露醇培养基进行培养,白色的背景可见黄色菌落
鉴定试验
鉴定致病性葡萄球菌最佳的试验:凝固酶试验
血浆凝固酶试验
鉴定致病性葡萄球菌的重要指标,玻片法和试管法
玻片法:纤维蛋白原+结合凝固酶=纤维蛋白
think it in this way: 结合较好,可以直接在简单的玻片检测,不被冲走
试管法:游离凝固酶+协同因子=凝血酶样物质,凝血酶样物质——凝固纤维蛋白
需要过夜培养,时间较长
需要协同因子的激活
用EDTA抗凝兔血浆最好
PYR试验
化脓菌都会是阳性
触酶试验
触酶=过氧化氢酶,大多数需氧菌和兼性厌氧菌都能产生过氧化氢酶,但是链球菌阴性
还有肠球菌、奈瑟菌属都是阳性的
链球菌阴性
可以鉴别链球菌和金葡菌
氧化酶试验
阴性
药敏试验
检测是否甲氧西林耐药,产生ß-内酰胺酶
在涂布了细菌的平板上放置纸片
阳性:绝壁的抑菌环
待测菌能产生分解有效物质的酶,完全抵抗抗生素,绝壁的边缘
阴性:沙滩样的抑菌环
没有产生灭活酶,还可以侵袭性的灭菌,模糊的边缘
链球菌属
乙型ß-溶血群
A群
化脓性链球菌
乙型A群链球菌
化脓性感染:丹毒、急性呼吸道感染
中毒性感染:猩红热,超敏反应,风湿热
致病力最强
B群
无乳链球菌
乙型B群链球菌
引起新生儿败血症、脑膜炎、肺炎
C、G群
ß内酰胺类、万古霉素、红霉素、克林霉素等
KB法
甲型α-溶血群
草绿色链球菌
青霉素、头孢等
引起亚急性细菌性心内膜炎,感染性心内膜炎
检测
E-test测试,没有KB法折点
肺炎链球菌
大叶性肺炎
检测
直接用E-test测试,没有KB法检测
采用MHA血平板
血平板可以方便观察菌落的溶血性
注意事项
组织标本中,荚膜生成较强——人体的营养相对较强
培养基直接培养的细菌,荚膜生成较弱——培养基中营养较低
人体的体液中的营养更加丰富,成分更加复杂
这也是为什么有些肠道菌群不能在培养基中生长,培养基没有达到体内的营养要求,也没有体内细菌环境的相互影响
除了非常具有标志性的spn肺炎链球菌(矛端相对钝端相向,还有荚膜),其他的G+都不需要报告形态,不能有太强的指向性
看到肠球菌的形态有链球菌的特征,不需要报告形态
在做触酶试验时,要注意不能碰到培养基的成分
红细胞中本身就含有过氧化氢酶,会产生假阳性
菌种鉴定
名称
金葡菌
A群链球菌
无乳链球菌
肺炎链球菌
肠球菌
脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
卡他莫拉菌
触酶
+
-
-
-
-
+
+
+
氧化酶
-
/
/
/
/
+
+
+
PYR
+
+
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/
-
/
/
/
杆菌肽
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+
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/
/
CAMP
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+
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/
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/
/
OP
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/
+
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/
胆汁溶菌
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+
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胆汁七叶苷
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+
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分解糖类
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葡萄糖、麦芽糖
葡萄糖
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DNA酶
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/
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/
+
化脓性感染G+c鉴定
标本采集
采取脓液或化脓性部位的渗出液标本
注意事项:避免周围正常菌群的污染
标本检查
涂片镜检
革兰染色标本,镜下观察菌体形态、聚集性
初步预测菌种
抗原、核酸检验
分离培养
接种在相应MHA培养基中,适宜条件下培养
观察菌落形态
鉴定试验
葡萄球菌属
血浆凝固酶试验
鉴定致病性葡萄球菌的重要指标,玻片法和试管法
玻片法:纤维蛋白原+结合凝固酶=纤维蛋白
试管法:游离凝固酶+协同因子=凝血酶样物质,凝血酶样物质——凝固纤维蛋白
用EDTA抗凝兔血浆最好
PYR试验
化脓菌都会是阳性
触酶试验
触酶=过氧化氢酶,大多数需氧菌和兼性厌氧菌都能产生过氧化氢酶,但是链球菌阴性
还有肠球菌、奈瑟菌属都是阳性的
链球菌阴性
可以鉴别链球菌和金葡菌
氧化酶试验
阴性
链球菌属
化脓性链球菌
(ß型A群链球菌)
PYR试验
化脓性链球菌产生桃红色,阳性
所有化脓性菌都可以是阳性
杆菌肽试验(A群链球菌筛选)
A群链球菌对杆菌肽敏感,可以用于鉴别其他PYR阳性的ß溶血性链球菌
肺炎链球菌
OP试验
肺炎链球菌的叶酸生物合成可以受到OP的干扰,抑制生长,表现为敏感
其他链球菌就是耐药,鉴别肺炎链球菌和其他链球菌
胆汁溶菌试验
胆汁或胆盐可以使肺炎链球菌溶解
鉴别肺炎链球菌和其他链球菌
无乳链球菌
(ß型B群链球菌)
CAMP试验
无乳链球菌可以产生CAMP因子,可以促进金葡菌的溶血能力,在两菌交界处出现协同溶血的作用
(并不是所有待测和金葡菌标准菌检测阴性,待测就不是无乳链球菌——可能是该金葡菌标准菌释放溶血素能力不够)
草绿色链球菌
鉴定困难
抗原性和溶血性没有相关性
微生物检验大致流程
采集标本
根据菌株的特性和定植位置,采取不同地方的样本
标本直接检查
显微镜检查
抗原检测
核酸检查
分离培养
鉴定
药敏试验