导图社区 第9章 肠杆菌科检验
书本:临床微生物学检验技术(“十二五”人卫版),本文提炼书中的重点内容,进行归纳整理,涵盖本书所有核心内容,非常方便大家学习。适用于考试复习、预习,提高学习效率。
编辑于2024-09-22 15:42:18《临床血液学检验技术思维导图》作品集,系统梳理了血液细胞分析、形态学识别、流式细胞术、凝血功能检测等核心知识点。通过直观的思维导图形式,助力医学学习者与从业者快速掌握临床血液检验精髓,提升诊断效率与准确性。
《临床微生物学检验技术思维导图》作品集,全面覆盖临床微生物学检验的精髓。该作品集以思维导图形式,深度解析细菌、真菌、病毒等微生物的检验流程、鉴定方法、药敏试验等关键词,助力医学检验人员快速掌握核心技能。
《临床生物化学检验技术思维导图》作品集,系统整合临床生物化学检验的核心知识与技能。该作品集以思维导图形式,精准覆盖检验方法、质量控制、疾病诊断、实验室管理等关键词,助力医学检验人员快速掌握临床生物化学检验精髓。
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肠杆菌科检验
概述
分类
埃希菌属
克雷伯菌属
肠杆菌属
志贺菌属
临床意义
最常见的病原菌,是泌尿道、呼吸道、肠道、腹腔盆腔的感染常见病菌
定位在肠道的细菌,可以感染最靠近的泌尿系统,引起相应的疾病
多数的肠杆菌科细菌都能引起肠道外感染
生物学特征
G-b
可能有形态很像球菌,可以发报告为肠球菌
一般是直杆菌
多数有鞭毛、能运动
除了肺炎克雷伯菌Kpn
有菌毛、少数有荚膜或包膜
需氧或兼性厌氧,营养要求不高
在普通平板上就可以生长,肠道的细菌一般都是营养要求不高
菌体两端较平直、钝圆
抗原性
菌体O抗原
种属特异性
是细菌细胞壁的成分,不被破坏
耐热
鞭毛H抗原
型特异性
不耐热的蛋白质抗原
是血清学分群和分型的依据
表面抗原(Vi、K抗原)
多糖抗原
不耐热,粘液或荚膜多糖结构决定表面抗原的特异性
不用于分型分群
抵抗性
抵抗力不强,不生成芽孢
不耐干燥、消毒剂敏感
微生物学检验
生化检验
分离培养
由于营养要求不高,可以用弱选择培养基培养
MAC中加入胆盐,可以对肠杆菌科进行筛选培养,只有肠杆菌科可以在上面生长
抑制G+的生长
菌株发酵乳糖时,可以在培养基上有红色,鉴别菌种的乳糖发酵能力
加入其他指示剂也可以显示不同的颜色,作为鉴别肠杆菌科
腹泻标本(含多种细菌)同时接种在MHA、强、弱选择培养基上
SS培养基用于鉴定沙门、志贺杆菌,对沙门的效果更好
SS培养基,对于产生H2S的细菌,可以利用培养基中的含硫氨基酸,生成黑色的H2S沉淀
生化鉴定试验
⚠️IMVC
吲哚IND试验
甲基红MR
V-P试验
枸橼酸盐CIT试验
肠杆菌科共有的特点(科间鉴定)
发酵葡萄糖
氧化酶试验-
触酶试验+
还原硝酸盐试验+
属间鉴定
苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐、VP鉴定
血清学检验
鉴定抗原
生化和血清学检验要同时完成才可以发放鉴定报告
药敏试验
作为G-b,要做超广谱ß-内酰胺酶、碳青霉烯类检测
初筛试验
头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)单独测试抑菌环
抑菌环很小,小于一定的直径
确证试验
头孢他啶(CAZ)和头孢他啶/克拉维酸(CAZ+C) 头孢噻肟(CTX)和头孢噻肟/克拉维酸(CTX+C)
复合物纸片进行检测,抑菌环如果扩大5mm以上,阳性、耐药
加了复合物才出现耐药
改良Hodge试验
培养基选择
MAC、SS培养基都是含有抑制剂的,测试药敏试验时不能应用。菌种不能完全的生长
BAP营养丰富,绝大部分菌都可以在上面生长。用来药敏试验,菌落可以充分生长
肠杆菌科常用的选择培养基
强选择培养基
SS平板
用于检测是否能分解H2S,加入中性红染料
阳性能产生黑色菌群
弱选择培养基
MAC平板
加入胆盐,可以抑制G+的生长
EMB平板
亚甲蓝作为指示剂
肠杆菌科
沙门菌属
临床意义
污染食物和水源,经口感染,伤寒和非伤寒沙门菌感染
主要引起肠道感染,引起患者的腹泻、发热和腹痛
伤寒:肠热证——从肠道的小肠黏膜细胞进入淋巴组织——进入血流(2w早期)——淋巴组织中致敏——到各器官中——再次入血——可以在粪便和尿液中有细菌(1-4w晚期——
带菌者可以持续的排出细菌
抽取血液可以在全程都进行检验,最好是用骨髓检查,但是少用
胆汁引流检查也可以
生物学特征
G-直杆菌,没有芽孢、荚膜,有鞭毛,可以在肠道定植(固定在小肠的黏膜细胞)
不能判断是球菌还是杆菌,只能看见直杆菌
培养特点
营养要求不高、不发酵乳糖(肠道致病菌)、产H2S
在SS培养基中黑色,能利用Fe铁离子产生黑色的H2S
⚠️常见的MAC、SS培养基中都有乳糖,接种上去没有颜色,就是没有发酵乳糖
抗原特点
O抗原
菌体抗原、多糖复合物,耐热稳定
分群的依据(大)
H抗原
鞭毛抗原,蛋白质抗原,不耐热不稳定
定型的依据(小)
Vi抗原
表面抗原,蛋白质抗原,不耐热不稳定
⚠️Vi抗原能干扰O抗原凝集,可用于Vi噬菌体的分型
抵抗力
不耐热,水中存活较久
⚠️耐胆盐、煌绿,可以制作选择培养基,留下沙门菌
微生物检验
标本:血液、尿液、粪便、骨髓
腹泻粪便标本
含有很多菌种,不接种在BAP上,营养要求较高,都能生长
MAC/SS选择培养基,可以剔除较多的菌种
脑脊液、关节腔积液
先增菌培养,在BAP上生长较好
初次分离时,若粪便中沙门菌数量较少,可用亚硒酸盐或GN增菌肉汤
1、生化鉴定,鉴定菌属
H2S+、乳糖-
吲哚试验全部阴性,可用吲哚试验纸片快速鉴别,但是阳性率较低
子主题 3
2、血清学鉴定,鉴定菌种
生理盐水对照+A-F多价试验
某些细菌在生理盐水中本身就能凝集
1、A-F多价O抗血清分群
伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌都含有Vi,可能会破坏O多价血清的检测
加热破坏了Vi后再做一次O抗原鉴定
2、O血清群单价血清定群
3、O9、Vi鉴定常见的伤寒沙门菌,O4
4、H抗原再分菌种
一定要先做生化,两种鉴定同时完成才能完全鉴定
药敏试验
1、2代头孢菌素,头霉素,氨基糖苷类药物可能有活性,但体内无效——直接报耐药
肠道分离的:常规检查和报告氨卞西林、氟奎诺酮类、复方新诺明
肠道外分离的:一种三代头孢菌素
志贺菌属
临床意义
侵袭力、内毒素、外毒素
菌毛粘附在回肠末端和结肠粘膜上皮细胞,在上皮繁殖
不进入血流⚠️很少引起菌血症,镜检怀疑志贺杆菌看看是不是判断错了
没有鞭毛
释放内毒素引起细菌性痢疾,主要的肠道疾病,引起内毒素血症
粘液脓血便,以脓液为主
生物学特性
G-短小杆菌,无芽孢、荚膜、鞭毛,没有鞭毛!!
培养特点
营养要求不高、不发酵乳糖
宋内志贺杆菌迟缓发酵乳糖⚠️
不产生H2S,MAC、SS中没有颜色
抵抗力:不强,不耐热,耐胆盐、苯酚(所以大部分肠杆菌都可以用胆盐筛选
对理化性质敏感,对酸敏感,运送培养时严格控制运送要求
微生物鉴定
标本:粪便或肛拭子
⚠️志贺菌不能用质谱仪进行鉴定,由于细菌核糖体蛋白的原因(其实是相同的属),机器不能识别区分,易鉴别为大肠埃希菌!分子生物学鉴定,大肠埃希菌=志贺菌
分离培养
BAP、SS、MAC,不产生硫化氢
也可以用对志贺菌分离较好的XLD培养基(木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐)
1、生化鉴定
KIA --,IMVC -+--,MIU +--,脲酶阴性
和大肠埃希菌鉴别
志贺菌没有动力,不发酵乳糖,在醋酸盐、枸橼酸盐琼脂上产碱
和沙门菌鉴别
KIA上和志贺杆菌类似,但是沙门菌可以产生H2S
2、血清学鉴定
A-D四群多价血清——O抗原——H抗原,生理盐水对照
但临床实际没有关注很多志贺杆菌的型
耶尔森菌属
临床意义
内毒素、鼠毒素、毒力决定因子
鼠疫耶尔森菌引起鼠疫,自然疫源性传染病
小肠结肠炎耶尔森菌:自限性胃肠炎、末端回肠炎、肠系膜淋巴结炎
假结核耶尔森菌:自限性胃肠炎,类似于阑尾炎
生物学特性
G-直杆状或球杆状,两端钝圆⚠️两级浓染
人工培养基上无荚膜、人体标本中有荚膜,无芽孢、鞭毛
培养基:耶尔森菌CIN培养基
普通培养基上生长缓慢
肉汤培养基中开始浑浊生长,24h后沉淀生长,48h逐渐形成菌膜,稍加摇动后菌膜呈钟乳石状下垂
抗原性
F1抗原是保护性抗原
药敏试验
耐药不严重,不需要开展
产H2S的G-
变形杆菌属
沙门菌属
枸橼酸杆菌属