体内药物分析评价

药物分析【药大临床专属】，包含常用生物样本的制备与贮藏、生物样本分析的预处理、生物样本分析方法的建立与验证、分析特点、名词解释等。

体内药物分析评价

• 分析特点
  • 样品前处理复杂
  • 样品采样量少、待测物浓度低、干扰物质多
  • 分析方法要求高
  • 工作量大
• 常用生物样本的制备与贮藏
  • 血样
    • 血样采集
      • 静脉，0.2~5ML
    • 血浆制备
      • 抗凝血剂（肝素），淡黄色上清液
    • 血清制备
      • 淡黄色液体
    • 全血制备
      • 分布于血细胞内外的药物浓度
    • 血液样本的贮存：冷藏或冷冻保存，短期4℃，长期-20℃或-80℃
  • 尿样：物质平衡、排泄途径及尿清除率
    • 尿样采集：自然排尿
    • 尿样储存
  • 唾液
    • 成年人1200ml/d
      • 立即测量体积（除泡沫部分）
      • 放置分层、离心取上清
  • 组织样
  • 不稳定生物样本
• 生物样本分析的预处理
  • 目的
    • 改善分析环境
    • 满足测定方法要求
    • 使待测物游离
  • 方法
    • 蛋白沉淀法：使结合型药物释放出来，以便测定药物的总浓度
      • 溶剂沉淀法【1:2~3】：加入与水混溶的有机溶剂, 蛋白析出→药物释放 常用：乙腈、甲醇
      • 中性盐析法【1:2】：饱和硫酸铵等
      • 强酸沉淀法【1∶0.6】：低于等电点， 三氯醋酸、高氯酸
      • 热凝固法：热变性蛋白质沉淀，90℃
    • 分离与浓集法
      • 液相萃取LLE
        • 大多数药物为脂溶性
        • 药物与内源性物质分配系数不同
      • 固相萃取SPE
        • 吸附、分配、离子交换或其他亲和力
      • 超滤
        • 多孔性半透膜进行膜分离，分离30~1000kD的可溶性生物大分子
    • 缀合物分离
      • 药物或其I相代谢产物与体内的内源性物质结合生成的产物称为II相代谢产物或缀合物
      • 方法
        • 酸水解：专一性差
        • 酶水解：专属性强
        • 溶剂解
    • 化学衍生化
      • 化合物经过化学变化，生成一个新的化合物，其性质更适用于某一种分析方法
      • 应用
        • GC
        • HPLC
• 生物样本分析方法的建立与验证
  • 方法
    • 色谱法
      • 大多数小分子药物的分析
    • 免疫法
      • 蛋白、多肽等大分子药物的分析
    • 生物学法
      • 抗生素类
  • 分析方法验证内容
    • 选择性：预期的待测物
    • 标准曲线与定量范围：在定量范围内QC样品浓度测定结果应达到试验要求的精密准和确度
      • 标准曲线的建立【大于6个点】
    • 残留、定量下限、精密度与准确度、稳定性、提取回收率、基质效应、稀释可靠性
• 名词解释
  • 分析批、质控样品等